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木聚糖酶检测底物 爱尔兰 |
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产品型号： |
m244396 |
产品报价： |
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产品特点： |
木聚糖酶检测底物编写的染色面粉阿拉伯木聚糖与Remazolbrilliant蓝R染料。衬底的测定远藤- 1 ,4 - β -名D -木聚糖酶。原则：该方法的具体程序为远藤- 1 ,4 - β -名D -木聚糖酶活力。论孵化偶氮小麦阿拉伯木聚糖的内切木聚糖酶的基板depolymerised由远藤机制产生 |
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m244396木聚糖酶检测底物 爱尔兰的详细资料： |
木聚糖酶检测底物
编写的染色面粉阿拉伯木聚糖与Remazolbrilliant蓝R染料。衬底的测定远藤- 1 ,4 - β -名D -木聚糖酶。
原则：
该方法的具体程序为远藤- 1 ,4 - β -名D -木聚糖酶活力。
论孵化偶氮小麦阿拉伯木聚糖的内切木聚糖酶的
基板depolymerised由远藤机制产生
低分子量色织碎片留在解决问题
此外，乙醇的反应混合物。高分子
重量材质去掉离心和颜色
上清液测定。内切木聚糖酶的检测解决方案
决定参照标准曲线。
衬底：
衬底制备高纯度的染色，以及部分
depolymerised小麦阿拉伯木聚糖与Remazolbrilliant蓝染料。
基板供应要么在粉末或可溶性
“随时可以使用的” form.Before配药，衬底应
暖室温和*混合的有力
shaking.It应免除了积极的位移
饮水机（如Eppendorf Multipette ® ） 。
溶解（粉末基板）
购买奶粉基板（ 1克） ，以100毫升的沸水和
大力搅拌水的热板搅拌器。打开热关闭
在加入底。继续搅拌，直至该解决方案
粉末*溶解（约15分钟） 。冷却
解决室温调节音量到100毫升。
加*（ 0.02克）作为防腐剂。储存在4 ℃之间
使用。在这种情况下，底将保持稳定
几年如果没有污染的酶。
沉淀解：
工业甲基烈酒（ 95 ％ V / V ）的乙醇（ 95 ％ V / V ）的。
缓冲溶液：
答：醋酸钠缓冲液（ 100毫米， pH值4.5 ）
购买六点?克的冰醋酸（ 1.05克/毫升） 800毫升的蒸馏水
水。调整pH值至4.5 ，增加了500万（ 20g/100毫升）
*溶液。大约50毫升是必要的。
调整音量，以1公升。
湾MES系统的缓冲区， 100毫米， pH值为6.0
购买二十一点三克的MES系统（六西格玛的M - 5287 ）至900毫升的蒸馏水
并调整pH值至6.0 5米（ 20g/100毫升）*
解决方案。调整音量，以1公升。
2ENZYME提取和稀释：
用一个积极的位移分配器（这些解决方案可
非常粘稠）添加液体酶样本（ 1.0毫升） ，以提取/
稀释缓冲液（ 49毫升， pH值4.5或pH值为6.0 ）和组合*。
这就是被称为原始提取物。稀一点零毫升本
解决10倍的除了九点零毫升提取/稀释
缓冲区A或B重复这一过程，直至稀释适合
检测结果。例如，对于工业酶
准备工作， Finizym （从黑曲霉;诺和诺德，
丹麦）和Laminex （从木霉。 ;杰
，美国）稀释原提取物
约100倍，是必要的。
粉末样品，购买一点○克的准备工作，以50毫升的
萃取/稀释缓冲A或B （ pH值4.5或6.0 ） ，轻轻
混合浆料在一段约15分钟，或直至样本
*是分散或dissolved.Clarify这一解决方案（在
原文摘录）离心（一千五百克， 10分钟）或过滤
通过瓦特曼第1号（ 9厘米）过滤器提取circles.Dilute本
进一步缓冲区A或B ，获得dilutionn适合
法（如酶的液体样品） 。
检测程序：
新增0.5毫升适当稀释和预平衡酶
解决方案在0.1米的醋酸钠缓冲液（ pH 4.5 ） [或0.1米的MES系统
缓冲液（ pH 6.0 ） ] ，以0.5毫升预平衡基板的解决办法。
搅拌混合物和孵化在40 ° C整整10分钟。
终止反应，沉淀unhydrolysed基
增加二点五毫升实验室级乙醇（ ? 95 ％ ）与
大力搅拌的旋涡混合器。允许管平衡
室温为10分钟，然后混合管
再次离心在1500克在台式离心机10
分钟。吸光度测定上清液解决方案
590纳米，并确定酶活性的交
标准曲线。
一个单位的酶活性是指金额
酶的释放需要一个micromole木糖
减少糖等值小麦阿拉伯木聚糖
（ 1 ％瓦特/ v ）在一分钟在40 ° C ， pH值4.5 （或pH值为6.0 ） 。
一个典型的标准曲线的木聚糖酶的黑曲霉
偶氮小麦阿拉伯木聚糖（批号20601 ）是图1所示。若要使用
本标准曲线，测定上述条件必须
严格遵守。
木聚糖酶检测底物
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